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    可靠的蛋白定量和表征,結(jié)構(gòu)生物學(xué)的好伙伴

    結(jié)構(gòu)生物學(xué)是生命科學(xué)的重要組成部分,主要研究生物大分子的分子結(jié)構(gòu)和形成,探討生物大分子的作用機(jī)制和原理。通過了解結(jié)構(gòu)的特點(diǎn),深入理解蛋白質(zhì)如何在生命活動(dòng)中進(jìn)行工作,進(jìn)而為探尋疾病根源、設(shè)計(jì)新藥提供新路徑。短短幾十年發(fā)展歷史中,已有十余個(gè)貝爾獎(jiǎng)?lì)C給了結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域。結(jié)構(gòu)生物學(xué)當(dāng)前是生物學(xué)家感興趣的領(lǐng)域之一。

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    每個(gè)生物大分子都具有獨(dú)特的三級(jí)結(jié)構(gòu),這取決于每個(gè)分子的“一級(jí)結(jié)構(gòu)”線性序列。理解分子的三級(jí)結(jié)構(gòu)是研究功能的基本前提。生物分子太小,即使用光學(xué)顯微鏡也無法觀察。為了可視化大分子的結(jié)構(gòu),需要使用波長(zhǎng)更短的輻射方法,以獲得足夠高的分辨率。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)生物學(xué)主要研究方法包括:

    ?質(zhì)譜(MS)

    ?高分子晶體學(xué)(X射線/XRC)

    ?核磁共振波譜(NMR)

    ?電子順磁共振波譜(EPR)

    ?冷凍電鏡(cryo EM)

    ?電子結(jié)晶學(xué)和微晶電子衍射

    ?多角度光散射

    ?小角散射

    ?激光吸收光譜法(LAS)

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    浙江大學(xué)冷凍電鏡中心 

    Nanophotometer? NP80用于蛋白濃度測(cè)量

    通常,所有這些方法都需要高純度的蛋白質(zhì)樣品,以提供可靠和可重復(fù)的結(jié)果,并避免潛在偽影和雜質(zhì)引起的誤導(dǎo)性觀察和錯(cuò)誤。在進(jìn)行精細(xì)的儀器分析之前,使用盡可能少量的樣本進(jìn)行質(zhì)量控制,是十分必要的的,可避免浪費(fèi)珍貴的樣本和時(shí)間。

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    清華大學(xué)結(jié)構(gòu)生物學(xué)創(chuàng)新中心《Cell Discovery》

    Nanophotometer?用于測(cè)量純化后的ABCB6蛋白濃度

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    中科院生物物理所 生物大分子重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室《Nature Plants》

    Nanophotometer?NP80

    用于測(cè)量光合作用PSI–LHCI–LHCII超分子復(fù)合物的光譜表征

    藍(lán)色:野生型;綠色:ΔLhcbM1突變型;紅色:ΔLhcbM5突變型

    Nanophotometer?作為微量樣品濃度測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)儀器,特別適用于珍貴的蛋白質(zhì)樣品的分析。所采用的樣品壓縮技術(shù),在檢測(cè)過程中無需形成液柱,避免了純化后的蛋白質(zhì)樣品表面張力降低的問題,因而在蛋白質(zhì)測(cè)量中具備優(yōu)勢(shì)。此外,低僅需0.3μl的樣品體積即可進(jìn)行進(jìn)行測(cè)量,大幅節(jié)省了珍貴樣品。封閉的檢測(cè)環(huán)境避免了測(cè)量過程中樣品的揮發(fā)。樣品臺(tái)良好的化學(xué)兼容性,可測(cè)量含有多種有機(jī)溶劑成分的樣品(具體請(qǐng)遵循化學(xué)兼容性表)。另外,通過全光譜掃描功能,還可獲得不同突變體樣品的光譜學(xué)表征,以反映精細(xì)結(jié)構(gòu)的改變。

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    Sample Control? 樣品質(zhì)量控制功能,作為樣品質(zhì)量監(jiān)測(cè)手段,為研究人員提供了可靠的信息,樣品中存在的的污染物將被標(biāo)記和提供信息。系統(tǒng)可通過A260/280比值對(duì)樣品純度進(jìn)行評(píng)估,如比值在0.5和0.6范圍之間,表示蛋白質(zhì)純度高,用于也可根據(jù)自己的要求定義閾值。

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    大多數(shù)情況下,結(jié)構(gòu)生物學(xué)所分析的生物大分子來源于表達(dá)和純化的流程,Nanophotometer?豐富的功能也能應(yīng)用于各個(gè)環(huán)節(jié):

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    Implen Nanophotometer?已應(yīng)用于清華大學(xué)結(jié)構(gòu)生物學(xué)創(chuàng)新中心,浙江大學(xué)冷凍電鏡中心、中科院生物物理所生物大分子國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究機(jī)構(gòu)和制藥公司,廣泛應(yīng)用于結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域的樣品表征和質(zhì)控。如您有相關(guān)應(yīng)用需求,Implen是值得您信賴的伙伴。

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